Infeksi mononukleosis: antibodi terhadap virus Epstein-Barr dalam darah

Infeksi mononukleosis adalah penyakit limfoproliferatif sistemik umum, paling sering disebabkan oleh virus Epstein-Barr. Toksoplasma gondii dan virus lainnya (CMV, human immunodeficiency virus dan human herpesvirus tipe 6, yang dikenal sebagai penyebab exantema mendadak) dapat menyebabkan penyakit serupa secara klinis. Agen etiologi yang sama ini diduga mampu menyebabkan perkembangan sindrom kelelahan kronis.

Virus Epstein-Barr adalah virus dari kelompok herpes, memiliki tropisme untuk limfosit B, terus-menerus bertahan di sel inang sebagai infeksi laten. Ini tersebar luas di seluruh dunia. Dengan struktur dan ukuran, virus Epstein-Barr tidak dapat dibedakan dari virus herpes lainnya, namun berbeda secara signifikan dari sifat antigeniknya. Virus ini memiliki antigen membran (antigen membran MA), antigen nuklir (EBNA-Epstein-Barris nucleic antigen), dan antigen kapsid virus (VCA).

Infeksi terjadi saat virus ditularkan dengan air liur. Virus Epstein-Barr, saat tertelan, menginfeksi epitel faring, menyebabkan radang dan demam - tanda klinis khas onset mononucleosis menular. Virus ini sangat limfotropik, bergabung dengan reseptor C3α dari membran sel limfosit B, ini menyebabkan proliferasi limfosit B poliklonal dengan peningkatan amandel, limfadenopati sistemik dan splenomegali yang sesuai. B-limfosit ditransformasikan (memperoleh kapasitas untuk pembelahan tanpa akhir), dan jika tidak ada tanggapan kekebalan seluler yang memadai, proses ini dapat berkembang menjadi sindrom lymphoproliferative yang jelas ganas (misalnya, terkait-X). Jika faktor imunitas selular mengendalikan replikasi virus Epstein-Barr di dalam tubuh, maka gejala klinis mononucleosis menular secara bertahap hilang.

Seperti virus herpes lainnya, virus Epstein-Barr dapat bertahan sebagai infeksi laten (DNA-nya terkandung di dalam nukleus sejumlah kecil limfosit B). Reaktivasi asimtomatik tanpa gejala secara umum jarang terjadi, sekitar 20% orang muda yang sehat mengeluarkan virus Epstein-Barr dengan air liur. Pada orang dengan gangguan kekebalan seluler (misalnya, pada penderita AIDS, ataksia-telangiektasia, penerima transplantasi), infeksi reaktif yang jelas dengan leukoplakia berbulu, pneumonitis interstisial, atau dalam bentuk limfoma sel B monoklonal dapat berkembang. Dengan virus Epstein-Barr, etiologi karsinoma nasofaring dan limfoma Burkitt saling terkait.

Salah satu manifestasi mononucleosis menular adalah penampilan pada darah perifer limfosit atipikal (sampai 10% dari jumlah total limfosit). Limfosit atipikal ditemukan di darah sejak awal periode manifestasi klinis infeksi. Kandungan mereka dalam darah mencapai puncaknya pada akhir 2 atau awal minggu ke-3 dan dapat bertahan pada tingkat ini hingga 1,5-2 bulan, penghilangan total biasanya terjadi pada awal bulan ke-4 sejak awal penyakit. Kehadiran limfosit atipikal adalah tanda infeksi yang relatif tidak sensitif yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr, namun memiliki spesifisitas total sekitar 95%.

Proliferasi B-limfosit poliklonal pada infeksi yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr, menghasilkan berbagai macam autoantibodi pada pasien, seperti IgM-anti-i (agglutinin dingin), faktor rheumatoid, antibodi antinuklear. Sebagian besar Igs yang tidak biasa yang muncul pada mononucleosis menular disebut antibodi heterophile Paul-Bunnel. Antibodi ini diklasifikasikan sebagai IgM, mereka memiliki afinitas untuk eritrosit kambing dan kuda, tidak diarahkan ke antigen virus Epstein-Barr manapun. Antibodi heterofilik adalah produk acak dari proliferasi B-limfoid (yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr), mereka muncul pada minggu pertama mononucleosis menular dan secara bertahap hilang saat sembuh, biasanya tidak terdeteksi setelah 3-6 bulan.

Karena tahap awal infeksi akut menjadi laten, genom virus Epstein-Barr (antigen unik) muncul dalam jumlah besar di semua sel, dan antigen nuklir dilepaskan ke lingkungan. Sebagai tanggapan terhadap antigen, antibodi spesifik disintesis - penanda yang berharga pada tahap penyakit. Tak lama setelah infeksi limfosit B, antigen awal (EA) terdeteksi, protein yang dibutuhkan untuk replikasi virus Epstein-Barr (dan bukan komponen virus struktural). Untuk antigen awal di tubuh pasien, antibodi golongan IgM dan IgG disintesis. Bersama dengan virus virus Epstein-Barr penuh, antigen dari capsid virus (VCA) dan antigen membran (MA) muncul. Seiring proses menular mereda, sebagian kecil limfosit B yang terinfeksi virus Epstein-Barr menghindari penghancuran kekebalan dan mempertahankan genom virus dalam bentuk laten. Antigen nuklir (EBNA) virus Epstein-Barr bertanggung jawab atas duplikasi dan kelangsungan hidupnya.

Tes laboratorium bisa mendeteksi antibodi terhadap berbagai antigen.

Dari metode serologis untuk mendiagnosis mononukleosis menular, reaksi Paul-Bunnel (aglutinasi) paling umum dilakukan, yang bertujuan untuk mendeteksi antibodi heterofilik dalam serum. Titer antibodi heterofilik 1: 224 dan lebih tinggi pada serum pasien dikenali sebagai signifikan secara diagnostik, mengkonfirmasikan diagnosis mononukleosis menular. Aglutinasi heterotrofi positif pada 60% orang muda setelah 2 minggu dan 90% setelah 4 minggu sejak timbulnya manifestasi klinis penyakit ini. Oleh karena itu, beberapa penelitian diperlukan untuk mendiagnosis mononukleosis menular: selama minggu pertama penyakit (reaksi mungkin negatif) dan 1-2 minggu kemudian (reaksi menjadi positif). Kandungan antibodi heterofilik menurun setelah akhir periode akut proses infeksius, namun titer mereka dapat ditentukan dalam waktu 9 bulan setelah onset gejala klinis. Reaksi Paul-Bunnel bisa berubah dari positif menjadi negatif, bahkan dengan latar belakang gejala hematologis dan klinis residu pada pasien. Sensitivitas metode pada orang dewasa adalah 98%, spesifisitas 99%. Pada anak-anak dengan mononucleosis menular sebelum usia 2 tahun, antibodi heterofilik dapat dideteksi hanya pada 30% pasien, pada usia 2-4 tahun - dalam 75%, di atas 4 tahun - lebih dari 90%. Sensitivitas metode pada anak kurang dari 70%, spesifisitasnya 20%. Pengurangan, dan kemudian peningkatan kembali titer antibodi heterofilik dapat terjadi sebagai respons terhadap infeksi lain (paling sering terjadi pada infeksi virus pada saluran pernapasan bagian atas). Tanggapan Paul-Bunnel tidak spesifik untuk virus Epstein-Barr. Titer antibodi heterofilik tidak memberikan reaksi silang dan tidak berkorelasi dengan antibodi spesifik terhadap virus Epstein-Barr, juga tidak berkorelasi dengan tingkat keparahan penyakit. Tes ini tidak berguna untuk mendiagnosis bentuk kronis mononucleosis infeksius (positif rata-rata hanya pada 10% pasien).

Titers 1:56 atau kurang dapat ditemukan pada orang sehat dan pada pasien dengan penyakit lain (rheumatoid arthritis, rubella). Hasil tes positif palsu terpenuhi sangat jarang.

Saat ini, metode "single spot" (aglutinasi slide) digunakan untuk menentukan antibodi terhadap eritrosit ram, awalnya digunakan sebagai tes skrining. Dengan sensitivitas, ini sebanding dengan reaksi Paul-Bunnel. Tes slide palsu palsu dapat sekitar 2% dari penelitian (pada leukemia, limfoma ganas, malaria, rubella, hepatitis virus, karsinoma pankreas), dan negatif palsu pada orang dewasa - dalam 5-7% kasus.

Perlu dicatat bahwa spektrum sistem uji diagnostik yang dihasilkan oleh perusahaan berdasarkan penentuan titer antibodi sangat luas, jadi perlu dipusatkan pada titer diagnostik antibodi yang ditentukan dalam petunjuk untuk sistem uji.

Jika antibodi heterofilik tidak terdeteksi, dan gambaran klinis penyakit ini sesuai dengan mononucleosis infeksius, perlu dilakukan pemeriksaan serum untuk antibodi spesifik pada kelompok IgM dan IgG. Untuk mendeteksi antibodi spesifik terhadap virus Epstein-Barr, metode imunofluoresensi tidak langsung digunakan (mendeteksi antibodi terhadap antigen EA dan VCA), anti-complement-immunofluorescence (mendeteksi antibodi terhadap EA, antigen VCA dan EBNA) dan ELISA.

Antibodi terhadap komponen antigen EA D (anti-EA-D) muncul bahkan pada periode laten infeksi primer dan cepat hilang dengan pemulihan.

Antibodi terhadap komponen R antigen EA (anti-EA-R) dapat dideteksi 3-4 minggu setelah manifestasi klinis penyakit ini. Mereka bertahan dalam serum darah selama sekitar satu tahun, sering terdeteksi dengan arus atipikal atau arus berkepanjangan dari mononucleosis menular. Biasanya, antibodi ini ditemukan dengan limfoma Burkitt.

Antibodi terhadap IgM IgA VCA (anti-VCA IgM) muncul sangat dini, biasanya pada gejala klinis, mereka terdeteksi pada saat timbulnya penyakit pada 100% kasus. Titer tinggi terjadi pada minggu 1-6 dari awitan infeksi, mereka mulai menurun dari minggu ke 3 dan biasanya hilang setelah 1-6 bulan. IgM anti-VCA hampir selalu hadir dalam serum dengan infeksi aktif, jadi metode pendeteksiannya sangat sensitif dan spesifik untuk episode akut mononucleosis infeksi.

Antibodi terhadap IgG kelas VCA (anti-VCA IgG) dapat muncul lebih awal (pada minggu 1-4 minggu), jumlah mereka mencapai puncak pada bulan ke-2 penyakit ini. Pada awal penyakit, mereka ditemukan dalam 100% kasus. Hanya 20% pasien yang menunjukkan peningkatan 4 kali lipat pada titer dalam studi pasangan sera. Titer menurun pada pemulihan, namun ditemukan dalam beberapa tahun setelah infeksi yang ditransfer, oleh karena itu tidak ada gunanya untuk diagnosis mononucleosis menular. Kehadiran IgG anti-VCA menunjukkan keadaan setelah infeksi dan imunitas.

Antibodi terhadap EBNA (anti-EBNA) muncul lebih lambat dari semua, jarang hadir pada fase akut penyakit ini. Kandungan mereka meningkat selama masa pemulihan (dalam 3-12 bulan), mereka dapat bertahan dalam darah selama bertahun-tahun setelah penyakit ini. Kurangnya anti-EBNA di hadapan IgM anti-VCA dan IgM anti-EA mengindikasikan adanya infeksi saat ini. Deteksi anti-EBNA setelah reaksi negatif sebelumnya menunjukkan adanya infeksi. Bila menggunakan metode ELISA, adalah mungkin untuk secara simultan mendeteksi adanya kelas anti-EBNA IgM dan IgG. Jika jumlah IgM anti-EBNA lebih besar daripada IgG anti-EBNA, infeksi akut harus dipertimbangkan, dengan hubungan sebaliknya menjadi yang terdahulu.

Untuk mendukung infeksi primer akut, satu atau lebih dari gejala berikut menunjukkan adanya:

• IgG anti-VCA (terdeteksi dini, dan kemudian isinya berkurang);
• Titer tinggi (lebih dari 1: 320) atau peningkatan 4 kali lipat dalam titer IgG anti-VCA selama perjalanan penyakit;
• kenaikan sementara pada titer anti-EA-D (1:10 atau lebih);
• IgG anti-VCA awal tanpa anti-EBNA, dan kemudian - munculnya anti-EBNA.

Infeksi akut atau primer yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr tidak disertakan jika titer anti-VCA IgG dan anti-EBNA dalam serum tidak berubah saat diuji dalam dinamika (periode akut dan pemulihan).

Kehadiran konstan antigen awal dan anti-VCA IgG pada titer tinggi mengindikasikan fase infeksi kronis.

Deteksi antibodi terhadap virus Epstein-Barr digunakan untuk mendiagnosis infeksi mononukleosis dan infeksi kronis yang disebabkan oleh virus Epstein-Barr.

Antibodi terhadap virus Epstein-Barr dapat dideteksi dalam penyakit berikut: immunodeficiency sekunder, termasuk infeksi HIV, karsinoma nasofaring, limfoma Burkitt, infeksi CMV, sifilis, penyakit Lyme, brucellosis, dan lain-lain.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]