Polymerase chain reaction (PCR) dalam diagnosis penyakit menular
Terakhir ditinjau: 23.04.2024
Semua konten iLive ditinjau secara medis atau diperiksa fakta untuk memastikan akurasi faktual sebanyak mungkin.
Kami memiliki panduan sumber yang ketat dan hanya menautkan ke situs media terkemuka, lembaga penelitian akademik, dan, jika mungkin, studi yang ditinjau secara medis oleh rekan sejawat. Perhatikan bahwa angka dalam tanda kurung ([1], [2], dll.) Adalah tautan yang dapat diklik untuk studi ini.
Jika Anda merasa salah satu konten kami tidak akurat, ketinggalan zaman, atau dipertanyakan, pilih dan tekan Ctrl + Enter.
PCR adalah salah satu metode diagnostik DNA, yang memungkinkan untuk meningkatkan jumlah salinan daerah yang terdeteksi dari genom (DNA) bakteri atau virus hingga jutaan kali dengan menggunakan enzim DNA polimerase. Segmen asam nukleat yang diuji untuk genom tertentu dikalikan (diperkuat) berkali-kali, yang memungkinkannya diidentifikasi. Pertama, molekul DNA bakteri atau virus dengan pemanasan dibagi menjadi dua rantai, lalu di hadapan primer DNA disintesis (urutan nukleotida spesifik untuk genom ditentukan) mengikat mereka dengan membentang komplementer DNA, disintesis untai kedua dari asam nukleat setelah setiap primer di hadapan DNA polimerase termostabil . Dua molekul DNA diperoleh. Prosesnya berulang berkali-kali. Untuk diagnosis, satu molekul DNA, yaitu satu bakteri atau partikel virus, cukup memadai. Pengenalan langkah tambahan dalam reaksi - sintesis DNA pada molekul RNA oleh enzim reverse transcriptase - memungkinkan untuk menguji virus RNA, misalnya virus HCV. PCR adalah proses tiga langkah, diulang secara siklis: denaturasi, anil primer, sintesis DNA (polimerisasi). Jumlah DNA yang disintesis diidentifikasi oleh ELISA atau elektroforesis.
PCR dapat digunakan dalam bahan biologis yang berbeda - serum atau plasma darah, menggores dari uretra, biopsi, cairan pleura, cairan serebrospinal, dll PCR pertama digunakan untuk diagnosis penyakit menular seperti virus hepatitis B, virus hepatitis C, virus hepatitis D, infeksi CMV, infeksi menular seksual infeksi (gonore, sampah diynaya, Mycoplasma, infeksi Ureaplasma), TBC, HIV -infektsiya dll
Keuntungan PCR dalam diagnosis penyakit menular melalui metode penelitian lainnya adalah sebagai berikut:
- agen penyebab infeksi dapat ditemukan di lingkungan biologis tubuh manapun, termasuk bahan yang diperoleh dengan biopsi;
- Hal ini dimungkinkan untuk mendiagnosis penyakit menular pada tahap awal penyakit;
- Evaluasi kuantitatif hasil penelitian adalah mungkin (berapa banyak virus atau bakteri yang terkandung dalam materi yang sedang diselidiki);
- sensitivitas metode yang tinggi; Sebagai contoh, sensitivitas PCR untuk mendeteksi DNA virus hepatitis B dalam darah adalah 0,001 pg / ml (sekitar 4 × 10 2 ), sedangkan sensitivitas metode hibridisasi DNA dengan menggunakan probe bercabang adalah 2,1 pg / ml (kira-kira 7 × 10 5 ).
[