virus hepatitis B

Hepatitis B adalah penyakit menular yang ditandai dengan kerusakan selektif hati oleh virus. Bentuk hepatitis ini adalah yang paling berbahaya dalam konsekuensinya di antara semua bentuk hepatitis virus yang diketahui. Agen penyebabnya adalah virus hepatitis B (HBV).

Untuk pertama kalinya antigen virus hepatitis B terdeteksi oleh B. Blumberg dalam serum darah orang Aborigin Australia pada tahun 1964, dan agen penyebabnya ditemukan pada tahun 1970 oleh D. Dein (dan yang lainnya) dan disebut partikel Dane, karena tidak ada kepastian yang lengkap. , bahwa ini benar-benar virus, bukan komponennya. Selanjutnya, semua keraguan hilang, karena pada partikel Dane, DNA genom dan DNA DNA-dependent DNA polimerase ditemukan. Virion mengandung tiga antigen utama, yang dengannya sebutan berikut diperkenalkan pada tahun 1974:

• HBsAg adalah antigen superfisial, atau larut, atau Australia.
• HBcAg adalah antigen inti (co-antigen).
• HBeAg adalah antigen e, yang terletak di inti virion dan, tidak seperti HBcAg, tidak hanya hadir dalam virion, tetapi juga beredar dalam darah dalam bentuk bebas atau sebagai kompleks dengan antibodi anti-HBeAg. Ini disekresikan ke dalam darah dari hepatosit dengan replikasi aktif HBV.

Antigen permukaan - HBsAg - ada dalam bentuk tiga varian morfologis yang berbeda: 1) mewakili supercapsid seluruh virion; 2) dalam jumlah banyak terjadi dalam bentuk partikel dengan diameter 20 nm, memiliki bentuk bola; 3) dalam bentuk filamen dengan panjang 230 nm. Secara kimiawi mereka identik. HBsAg mengandung satu antigen umum dan dua pasang penentu jenis yang saling eksklusif: d / y dan w / r, oleh karena itu ada empat subtipe utama HBsAg (dan masing-masing, HBV): adw, adr, ayw dan aur. Antigen a menyediakan pembentukan imunitas silang yang umum ke semua subtipe virus.

Sebenarnya, virion, partikel Dain, memiliki bentuk bola dan diameter 42 nm. Supercapsid virion terdiri dari tiga protein: utama (utama), besar dan sedang. Genom ini tertutup dalam kapsid dan diwakili oleh DNA annular beruntai ganda dengan massa 1,6 MD. DNA terdiri dari sekitar 3200 nukleotida, namun "plus" -merek 20-50% lebih pendek dari tanda minus. Dengan ujung 5 'dari filamen panjang, protein spesifik virus terikat secara kovalen. Ujung 5 'dari kedua untai saling melengkapi dan membentuk "lengket" sekuen 300 panjang nukleotida, sehingga filamen ditutup di ring. Kandungan G + C dalam virion DNA adalah 48-49% mol. Inti dari virion itu ada di samping DNA polymerase DNA-DNA genomik. DNA "minus" -define HBV hanya berisi empat gen (S, C, P dan X), namun keduanya sangat kompak. Gen S, C, P, X sangat tumpang tindih dan mengendalikan sintesis produk berikut. Gene S kode untuk sintesis protein mantel utama dan berisi semua informasi tentang antigen permukaan HBsAg. Selain itu, ia mengkodekan sintesis protein amplop menengah dan besar. Protein mengandung ujung COOH yang umum, namun terjemahannya dimulai dengan tiga kodon inisiator yang berbeda. Gene C kode untuk sintesis protein kapsid (HBcAg dan HBeAg); Meskipun protein ini dikodekan oleh gen tunggal, cara terjemahannya berbeda. Gene P adalah yang terbesar. Ini termasuk bagian dari ketiga gen lainnya dan mengkodekan enzim yang diperlukan untuk replikasi virus. Secara khusus, ini mengkodekan reverse transcriptase, domain enzim RNA-ase H, protein terminal-5'dari "minus" -chain. Gen X kode untuk protein yang mengatur ekspresi (ekspresi) semua gen virus, khususnya protein dengan massa 17 kD, yang merupakan transaktivator transkripsi gen.

Protein yang membentuk antigen permukaan ada dalam bentuk glikosilasi (gp) dan non-glikosilasi. Glikosilasi adalah gp27, gp33, gp36 dan gp42 (angka dilambangkan dengan m di kD). HBV supercapsid terdiri dari protein S-protein utama, atau dasar (92%); protein M rata-rata (4%) dan besar, atau panjang, L-protein (1%).

• Protein utama, p24 / gp27, atau protein utama (protein S), adalah komponen utama dari amplop HBV. Dengan tidak adanya protein tempurung lain, ia mempolimerisasi dan membentuk partikel bola dengan diameter 20 nm, yang terdiri dari 100 molekul polipeptida.
• Protein besar, p39 / gp42, atau protein panjang (protein L), hadir dalam ketiga bentuk HBsAg. Ini memainkan peran penting dalam morfogenesis virion dan saat keluar dari sel. Protein L mengandung urutan protein M yang dilengkapi dengan N-terminus dengan urutan 108 (ayw) atau 119 (adw, adr, ayr) residu asam amino yang dikodekan oleh daerah npe-Sl gen S.
• Protein tengah - gp33 / gp36, atau protein M, juga hadir dalam ketiga bentuk morfologi HBsAg. Protein M mengandung, pada N-terminus, sebuah daerah dengan 55 residu asam amino yang dikodekan oleh daerah pra-52 gen S. Diasumsikan bahwa situs ini memainkan peran penting dalam pengenalan virus hepatitis B oleh sel hati dari kisaran host terbatas (monyet simpanse manusia). Urutan protein yang dikodekan oleh daerah S-gen npe-S memiliki immunogenisitas tinggi, dan determinannya terletak di permukaan virion. Oleh karena itu, antibodi terhadap antigen ini berperan penting dalam pembentukan kekebalan terhadap hepatitis B.

Sintesis protein virus dikontrol dengan ketat pada tingkat transkripsi dan translasi. Dalam transkripsi genom virus, dua jenis mRNA disintesis:

• yang lebih kecil - 2100 nukleotida - mengkodekan protein utama dan tengah membran;
• besar - 3.500 nukleotida, yaitu lebih panjang dari DNA genom itu sendiri; Ini berisi pengulangan 100 panjang nukleotida.

Jenis mRNA ini mengkode protein kapsid dan produk gen P. Ini juga merupakan template untuk replikasi DNA virus. Sebagai bagian dari genom, ada enhancer (enhancer transkripsi) - elemen peraturan yang mengaktifkan ekspresi semua gen virus dan bertindak terutama di sel hati. Secara khusus, gen S diekspresikan pada tingkat yang sangat tinggi hanya di sel hati dan di bawah pengaruh hormon steroid. Keadaan ini menjelaskan mengapa hepatitis B kronis dan kanker hati (hepatoma) diamati pada pria lebih sering daripada pada wanita yang memiliki tingkat hormon steroid lebih rendah.

Unsur peraturan lain dari virus hepatitis B memodulasi (mengendalikan) tingkat sintesis protein individu. Misalnya, protein besar hanya disintesis dalam jumlah kecil. Sebagian besar di permukaan virion menular. Dan protein utama dan, pada tingkat yang lebih rendah, protein tengah disintesis dalam jumlah besar dan meninggalkan sel di partikel antigen permukaan, yang dalam serum mengandung berkali-kali lebih banyak daripada virion matang. Jumlah partikel antigen permukaan bisa 1011 -1013 per 1 ml darah (beberapa ratus μg).

Virus Hepatitis B diisolasi dalam keluarga virus baru - Hepadnaviridae, genus Orthohepadnavirus. Hepadnaviruses serupa ditemukan pada berbagai hewan (protein tanah, marmut, tupai, bebek Peking).

Reproduksi hepadnavirus berlangsung dengan cara yang tidak biasa. Secara khusus, replikasi DNA genomik terjadi melalui link perantara - RNA, yaitu dengan mekanisme reverse transcription.

Siklus hidup virus hepatitis B.

• Adsorpsi pada sel.
• Penetrasi ke dalam sel oleh mekanisme reseptor yang dimediasi endositosis (limfosit berbatas fossa -> vesikel berbatas -> lysosome -> hasil nukleokapsid dan penetrasi genom virus ke dalam inti hepatosit).
• Reproduksi intraselular

Selama penetrasi ke dalam sel, rantai DNA pendek ("plus") memanjang (selesai). Di dalam nukleus, DNA RNA polimerase bergantung seluler mensintesis RNA 3.500 nukleotida (pregenes) dan mRNA yang lebih kecil untuk sintesis protein virus. Kemudian, pregene dan DNA polimerase virus dimasukkan ke dalam kapsid yang baru disintesis, yang dipindahkan ke sitoplasma. Di sini, transkrip balik pregenoma terjadi. Ini mensintesis DNA "minus" baru. Setelah sintesis DNA minus selesai, RNA pregenomik hancur. DNA polimerase virion pada rantai "minus" mensintesis "plus" -chain. Viral DNA, sekarang beruntai ganda, bisa eksis di dalam sel cukup lama dan kembali ke nukleus untuk siklus replikasi berikutnya. Jika partikel virus baru tidak mengalami replikasi lebih lanjut, maka nukleokapsid yang terbentuk, melewati selaput sel, ditutupi dengan kapsid super kapsul, sel dari sel, dan rantai DNA "plus" pendek segera berhenti di situ. Itu sebabnya panjang benang ini bervariasi. Dalam bentuk akut hepatitis B yang khas, secara serologis penanda serologis berikut muncul berturut-turut dalam darah: HBsAg, HBeAg dan antibodi (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg dan anti-HBsAg.

Virus hepatitis B tidak mengandung onkogen, namun ditetapkan bahwa dengan memasukkan ke dalam kromosom sel (di tempat yang berbeda), DNA virus dapat menginduksi di dalamnya berbagai perubahan genetik - deletions, translokasi, amplifikasi, yang dapat menyebabkan kanker hati - satu dari konsekuensi paling serius dari virus hepatitis B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Ketahanan virus hepatitis B

Virus hepatitis B sangat resisten. Pada suhu kamar tetap bertahan selama 3 bulan, dalam keadaan beku - selama beberapa tahun. Virus ini benar-benar tidak aktif dengan autoklaf (120 ° C), dididihkan selama 30 menit, panas kering pada 180 ° C selama 60 menit, pada suhu 60 ° C selama 10 jam. Hal ini stabil dalam media asam, namun hancur dalam basa. Virus meninggal saat diobati dengan H202, kloramin, formalin, fenol dan dengan iradiasi UV.

Patogenesis dan gejala hepatitis B

Virus ini secara hematogen disuntikkan langsung ke hati. Dalam patogenesis hepatitis, respon humoral dan seluler autoimun memainkan peran penting. Diasumsikan bahwa kekalahan hepatosit dikaitkan tidak begitu banyak dengan aksi langsung virus itu sendiri seperti reaksi imunologis inang yang timbul sehubungan dengan modifikasi membran sel oleh protein virus yang menginduksi pembentukan autoantibodi ke sel hati. Oleh karena itu, mengembangkan hepatitis kronis dan sirosis hati dapat dianggap sebagai penyakit autoimun.

Reaksi autoimun seluler terhadap protein virus yang terkandung dalam membran hepatosit dimediasi oleh limfosit T-sitotoksik dan sel pembunuh hati lainnya. Oleh karena itu, distrofi akut hati dapat dianggap sebagai reaksi penolakan heterograft yang aneh.

Masa inkubasi berlangsung dari 45 sampai 180 hari, rata-rata 60 sampai 90 hari. Jalur klinis hepatitis B ditandai oleh keragaman yang besar; Penyakit ini dapat terjadi: dalam bentuk laten, hanya terdeteksi oleh metode laboratorium, dalam bentuk khas icteric dan dalam bentuk ganas yang berakhir mematikan. Durasi tahap pra-ikal didahului dari satu hari sampai beberapa minggu. Periode icteric, secara umum, panjang dan ditandai dengan gejala yang ditandai dengan baik (ikterus, hiperbilirubinemia, penggelapan urin, glukosa icteric). Bentuk yang berkepanjangan diamati pada 15-20% pasien, dan pada 90% di antaranya hepatitis B kronis berkembang. Pada pasien dengan bentuk yang masih ada, proses autoimun sering diamati, disertai dengan peningkatan kandungan antibodi anti-hepatitis, yang dideteksi dengan uji imunosorben (IFM). Pada anak-anak, hepatitis B ringan dan sering tanpa penyakit kuning, pada anak kecil - kebanyakan asimtomatik.

Imunitas Postinfectious (humoral dan seluler) panjang, seumur hidup, karena antibodi penetralisir virus (anti-HBsAg) tanpa adanya antigen permukaan dalam darah. Sering diamati imunisasi laten karena kontak berulang dengan HBV, yang merupakan penyebab kekebalan meluas terhadap virus di kalangan penduduk. Biasanya pasien dengan bentuk akut hepatitis B pulih sepenuhnya saat antibodi menumpuk. Namun, dalam beberapa kasus, terlepas dari tingginya kadar antigen virus dalam darah (keadaan yang menjelaskan mengapa infeksi parenteral paling sering terjadi), antibodi terhadapnya tidak diproduksi. Virus tetap berada di hati, dan seseorang untuk waktu yang lama, kadang seumur hidup, menjadi pembawa kronis. Keadaan ini jelas terkait dengan lemahnya respon imun. Salah satu hasil paling umum dari hepatitis B kronis adalah sirosis dan kanker hati, yang berkembang setelah masa laten hingga 30-50 tahun.

Epidemiologi hepatitis B

Sumber infeksi virus hepatitis B hanya seseorang. Berlawanan dengan kepercayaan masa lalu bahwa infeksi virus hepatitis B terjadi secara parenteral secara eksklusif, sekarang terbukti ditemukan dalam berbagai rahasia dan ekskreta: dalam air liur, pembuangan nasofaring, kotoran, cairan air mata, sperma, darah menstruasi, dll. Jadi, Infeksi terjadi tidak hanya secara parenteral, tapi juga secara seksual dan vertikal (dari ibu ke janin), yaitu menginfeksi virus hepatitis B dengan cara yang berbeda.

Hepatitis B di dunia membunuh banyak orang seperti selama bertahun-tahun Perang Dunia II. Jumlah pembawa HBV, menurut WHO, adalah dari 0,1 sampai 20% populasi dari berbagai negara atau wilayah.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnosis hepatitis B

Saat ini, metode utama untuk diagnosis hepatitis B adalah penggunaan reverse hemaglutination reaction (ROSGA) pasif untuk mendeteksi virus atau antigen permukaannya, HBsAg. Seperti telah dicatat, darah antigen permukaan mengandung berkali-kali lebih banyak daripada virus itu sendiri (100-1000 kali). Untuk reaksi ROPGA, eritrosit peka dengan antibodi terhadap virus hepatitis B. Jika ada antigen dalam darah, terjadi reaksi hemaglutinasi. ROPGA sederhana, nyaman, sangat spesifik. Untuk mendeteksi antibodi terhadap antigen virus HBsAg, berbagai metode imunologi (DSC, RPGA, IFM, RIM, dll.) Digunakan. Selain itu, varian PCR digunakan untuk mendeteksi HBV dan antigennya.

Berbagai metode imunologi dapat digunakan untuk mendeteksi antibodi terhadap antigen virus (HBsAg) dalam serum pasien (DSC, RPGA, reaksi presipitasi, IFM, RIM, dll.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Pencegahan spesifik hepatitis B

Dengan memperhitungkan tingginya kejadian hepatitis B, dan juga bahwa ada banyak pembawa HBV di dunia, vaksinasi WHO terhadap hepatitis B adalah wajib dan harus dilakukan pada tahun pertama kehidupan. Dua jenis vaksin disarankan untuk vaksinasi. Untuk mempersiapkan salah satunya, plasma pembawa virus digunakan sebagai bahan baku, karena antigen virus di dalamnya terkandung dalam jumlah yang cukup untuk persiapan vaksin. Kondisi utama untuk persiapan jenis vaksin ini adalah keamanannya yang lengkap, yaitu inaktivasi lengkap virus, yang disediakan oleh teknologi pembuatan vaksin. Untuk memproduksi vaksin dengan jenis yang berbeda, metode rekayasa genetika digunakan, khususnya, tiruan rekombinan ragi yang menghasilkan antigen permukaan virus hepatitis B digunakan untuk menyiapkan bahan antigenik.

Kedua vaksin tersebut sangat efektif (melindungi 95% dari vaksinasi). Durasi kekebalan postvaccinal tidak kurang dari 5-6 tahun. Vaksin telah dibuat untuk orang dewasa dan bayi dan anak kecil - komponen terpenting dalam perang global melawan hepatitis B. Vaksinasi penuh terdiri dari tiga suntikan:

Saya dosis - segera setelah lahir; II dosis - setelah 1-2 bulan; III dosis - sampai akhir tahun pertama kehidupan.

Vaksin ini termasuk dalam program imunisasi WHO yang diperluas dan dikombinasikan dengan kalender pelaksanaannya (berdasarkan rekomendasi WHO, vaksinasi terhadap tuberkulosis, poliomielitis, hepatitis B, campak, tetanus, difteri, pertusis dilakukan pada tahun pertama kehidupan).

Gammaglobulin, yang mengandung antibodi melawan HBV, digunakan untuk imunoprofilaksis pasif darurat kepada orang-orang yang pernah kontak dengan pasien hepatitis B.

Untuk mengobati hepatitis B (bentuk akut dan kronis) gunakan interferon dan amixin (untuk induksi sintesis endogennya). Dalam pengobatan hepatitis B kronis, obat lamivudine baru (nukleosida sintetis) efektif.