Imunofenotip hemoblastosis

Kemajuan signifikan dalam studi hematologi telah dikaitkan dalam beberapa tahun terakhir dengan menggunakan metode imunologi modern dan cara otomatis untuk menganalisis dan menyortir sel-sel dari aliran darah tepi dan cytometers sumsum tulang. Morfologi tradisional dan studi cytochemical penyakit sel substrat (darah, merah sumsum tulang, kelenjar getah bening, limpa, dll), dalam banyak kasus, terutama pada penyakit limfoproliferatif, tidak mengungkapkan seluruh berbagai pilihan antara morfologi bentuk yang sama dan mengidentifikasi asal klon patologis . Masalah ini bisa diatasi hanya dengan mempelajari karakteristik imunologis sel. Setiap tahap diferensiasi sel hematopoietik sesuai dengan antigen sendiri, yang menurut klasifikasi internasional disebut diferensiasi dan dibagi ke dalam kelompok diferensiasi, dilambangkan dengan CD.

Dengan perubahan neoplastik, blok diferensiasi dapat terjadi pada setiap tahap perkembangan sel normal, menghasilkan pembentukan tiruan sel patologis yang menentukan substrat penyakit dan memiliki karakteristik imunologis (atau fenotipik) yang sama. Setelah studi tanda tersebut di sel dapat ditentukan oleh bentuk atau perwujudan dari penyakit konsisten, yaitu atas dasar diagnosis fenotip sel diferensial imunologi, yang paling sulit dalam gangguan limfoproliferatif, karena penyakit patologis substrat sel utama adalah hampir sama dengan tipe sel morfologis.

Phenotyping memungkinkan pengetikan blast dan sel darah matang dari seri myelo-, mono-, dan limfositik menggunakan antibodi monoklonal dengan adanya antigen diferensiasi (reseptor) di dinding sel. Pada bagian "Evaluasi status kekebalan organisme," karakteristik dan signifikansi diagnostik dari penanda sel sebagian digambarkan; Berikut adalah deskripsi singkat penanda sel antigenik yang diaplikasikan pada diagnosis hemoblastosis. Pada selaput sel darah dan sumsum tulang merah, antigen berikut (spidol) dapat diidentifikasi.

• CD2 adalah glikoprotein transmembran monomerik. Ini hadir pada permukaan semua limfosit T yang beredar dan beberapa limfosit NK. CD2 mengambil bagian dalam proses aktivasi alternatif limfosit-T. Deteksi CD2 menggunakan antibodi monoklonal dalam praktik klinis digunakan untuk fenotip leukemia sel T akut, limfoma, kondisi inflamasi dan imunodefisien kronis.
• CD3 - kompleks protein yang terkait dengan reseptor sel T spesifik antigen, merupakan penanda fungsional utama limfosit-T. Ini memudahkan pengalihan sinyal aktivasi dari membran ke sitoplasma sel. Deteksi CD3 diindikasikan untuk diagnosis leukemia sel T akut, limfoma (CD3 tidak diekspresikan pada tumor limfoid non-T-cell) dan penyakit kekebalan tubuh.
• CD4 adalah glikoprotein transmembran yang diekspresikan oleh subpopulasi T-helper (induser) yang merupakan 45% limfosit darah perifer. Pada tahap awal perkembangan limfosit di timus, antigen CD4, dan CD8, diekspresikan oleh semua limfosit kortikal. Selenium thymocytes, yang fenotipnya serupa dengan sel CD4 + T-sel darah merah (T-helper) dewasa, yang sudah mengekspresikan reseptor CD4 atau CD8. Dalam darah perifer, sampai 5% sel secara bersamaan diberi label CD4 dan CD8. Sedikit ekspresi CD4 mungkin terjadi pada beberapa sel monosit. CD4 dinyatakan dalam banyak kasus oleh limfoma sel T, termasuk mikosis jamur, serta leukemia sel T HTLV (HTLV-human T-lymphotropic virus).
• CD5 - glikoprotein rantai tunggal, yang hadir pada semua limfosit T matang dan sebagian besar timosis, dinyatakan dengan lemah oleh limfosit B. CD5 terdeteksi pada sel neoplastik leukemia limfositik kronis sel B dan limfoma centrokologi. Pada jenis penyakit limfoid ganas lainnya - limfoma folikel, sel leukemia berbulu, limfoma sel besar - CD5 tidak diungkapkan.
• CD7 adalah protein beruntai tunggal, penanda awal diferensiasi sel T. Hal ini diungkapkan oleh pro-T-limfosit bahkan sebelum mereka bermigrasi ke timus. CD7 terdeteksi pada sebagian besar sel NK, ekspresi lemah dicatat pada monosit. B-limfosit dan granulosit tidak mengandung antigen ini. Definisi CD7 digunakan untuk diagnosis limfoma, leukemia limfoblastik sel T anak-anak.
• CD8 adalah protein yang terdiri dari dua rantai polipeptida yang dihubungkan oleh jembatan disulfida. Hal ini diungkapkan oleh subpopulasi limfosit T sitotoksik dan penekan, yang terdiri dari 20-35% limfosit darah perifer. Antigen ini juga memiliki limfosit NK, thymocytes kortikal, 30% thymocale medullary, dan subpopulasi sel sumsum tulang merah. CD8 diperiksa untuk evaluasi kuantitatif kandungan T-supresor (lihat bagian "T-limfosit-penekan dalam darah" di atas).

• CD10 adalah endopeptidase yang terkait dengan membran sel. CD10 mengekspresikan bentuk muda limfosit B dan subpopulasi limfosit korteks. CD10 mengekspresikan semua sel dari ALL.
• CD11c mengekspresikan makrofag, monosit, granulosit, sel NK dan sel leukemia sel berbulu pada membran sel.
• CD13 adalah glikoprotein yang diekspresikan oleh sel myelomonocytic (sel progenitor, neutrofil, basofil, eosinofil, monosit dan sel myeloid leukemia). Ini tidak ada dalam limfosit T dan B, eritrosit dan trombosit.
• CD14 adalah glikoprotein membran permukaan. Hal ini diungkapkan terutama oleh monosit dan makrofag. CD14 terdeteksi di lebih dari 95% monosit darah perifer dan sumsum tulang. Ekspresi CD14 yang kuat diamati pada leukemia myeloblastic akut. Pada leukemia limfoblastik akut dan kronis, antigen ini tidak diekspresikan.
• CD15 adalah oligosakarida. Ia mengambil bagian dalam proses fagositosis dan kemotaksis. Antigen ini hadir pada permukaan granulosit matang dan sel Berezovsky-Sternberg. Ekspresi antigen CD15 terdeteksi pada penyakit Hodgkin. Pada limfoma non-Hodgkin, CD15 tidak terdeteksi pada kebanyakan kasus.
• CD16 diekspresikan pada permukaan granulosit, monosit, makrofag dan sel NK. Semua limfosit yang mengekspresikan antigen ini memiliki kemampuan untuk sitotoksisitas seluler yang bergantung pada antibodi. CD16 ditentukan saat mengetik leukemia myelocytic kronis, untuk mengkarakterisasi sel NK.
• CD19 adalah kehadiran glikoprotein pada semua limfosit B perifer, dan juga pada semua prekursor sel B. Ini tidak ada pada sel plasma. Ini adalah penanda awal sel B, memainkan peran penting dalam mengatur aktivasi dan proliferasi limfosit B. CD19 diekspresikan pada semua sel leukemia akut dari sel leukemia akut, dan juga terdapat dalam beberapa bentuk leukemia monoblas akut.
• CD20 adalah protein non-glikosilasi. Dalam ontogenesis limfosit B, antigen CD20 muncul setelah CD19 pada tahap diferensiasi sel B-sel pra-B. Ini tidak ada pada membran plasma sel plasma. Hal ini dinyatakan dalam SEMUA, leukemia limfositik sel B kronis, leukemia sel berbulu, limfoma Burkitt dan sangat jarang pada leukemia monoblas akut.
• CD21 adalah glikoprotein, dalam jumlah yang signifikan terdapat pada limfosit B pada organ limfoid dan dalam jumlah kecil pada sel B dari darah perifer. CD21 adalah reseptor untuk virus Epstein-Barr.
• CD22 adalah protein yang terdiri dari dua rantai polipeptida. Hal ini diungkapkan pada membran kebanyakan limfosit B, termasuk sel progenitor (prolymphocytes). Antigen tidak diekspresikan pada B-limfosit (sel plasma) setelah aktivasi mereka. Ekspresi CD22 yang paling menonjol terdeteksi pada sel dengan sel leukemia berambut, lemah - pada leukemia myeloid dan sel T non-sel.
• CD23 adalah glikoprotein yang ditunjukkan oleh limfosit B yang teraktivasi pada darah tepi ke tingkat yang jauh lebih besar. CD23 memediasi sitotoksisitas dan fagositosis IgE-dependent oleh makrofag dan eosinofil.
• CD25 adalah glikoprotein rantai tunggal yang diidentifikasi sebagai reseptor afinitas rendah untuk IL-2. Reseptor ini diekspresikan pada limfosit T yang diaktifkan dan, pada kerapatan yang lebih rendah, pada sel B yang diaktifkan. Pada darah perifer orang sehat, antigen hadir di lebih dari 5% sel limfoid.
• CD29 adalah reseptor fibronektin. Hal ini didistribusikan secara luas di jaringan, dinyatakan oleh leukosit. Deteksi CD29 pada sel darah tepi digunakan untuk menggambarkan subpopulasi sel T yang memiliki fenotipe CD4 + CD29 +, yang disebut Tipe 2 pembantu (Th2). Sel-sel ini, melalui produksi limfokin, berpartisipasi dalam realisasi respon imun humoral.
• CD33 adalah transmembran glikoprotein. Ini hadir di permukaan sel dari seri myeloid dan monocytic. Hal ini ditemukan pada permukaan monosit dan, pada tingkat yang lebih rendah, granulosit dari darah tepi. Sekitar 30% sel sumsum tulang merah mengekspresikan CD33, termasuk myeloblasts, promyelocytes dan myelocytes. Antigen tidak ada pada selaput sel induk pluripoten. CD33 digunakan untuk mengkarakterisasi sel pada leukemia myeloid. Sel leukemia dari limfoid dan eritroid tidak mengekspresikan CD33.
• CD34 adalah fosfoglikoprotein, yang ditunjukkan oleh sel progenitor hematopoietik, termasuk sel induk monopoten. Ungkapan Ar yang paling menonjol diamati pada nenek moyang awal; Saat sel matang, ekspresi penanda jatuh. CD34 juga ditemukan pada sel endotel. CD34 digunakan untuk mengkarakterisasi sel pada leukemia myelogenous dan lymphoblastic akut. Dengan leukemia limfositik kronis dan limfoma, ekspresi antigen CD34 tidak terdeteksi.

• CD41a diungkapkan oleh platelet dan megakaryocytes. Antibodi monoklonal untuk deteksi CD41a digunakan untuk mendiagnosa leukemia megakaryoblastic. Dengan trombastenia Glązmann, ekspresi antigen ini tidak ada atau secara signifikan ditekan.
• CD42b adalah membran glikoprotein yang terdiri dari dua rantai polipeptida. Penanda ini ditemukan di permukaan platelet dan megakaryocytes. Dalam praktik klinis, deteksi CD42b digunakan untuk mendiagnosis trombositopati - sindrom Bernard-Soulier.
• CD45RA termasuk dalam kelas transmembran glikoprotein. Ini adalah antigen leukosit yang umum. Hal ini diungkapkan pada membran sel limfosit B, pada tingkat yang lebih rendah T-limfosit dan pada thymocimes meduler dewasa. Penanda tidak dinyatakan oleh granulosit.
• CD45RO adalah isoform berat molekul rendah dari CD45RA, leukosit umum Ag. Mereka ditemukan di sel T (limfosit T-memori), subpopulasi limfosit B, monosit dan makrofag. Antibodi monoklonal terhadap CD45RO berinteraksi dengan kebanyakan timosis, subpopulasi CD4 + dan limfosit CD8 + T dan sel T matang. Sel asal myelomonocytic, granulosit dan monosit juga membawa antigen ini. Hal ini terdeteksi pada limfoma sentroblastik dan imunoblastik.
• Dimer CD46 - O-glikosilasi. Ini didistribusikan secara luas ke dalam jaringan dan diekspresikan oleh limfosit T dan B, monosit, granulosit sel NK, trombosit, sel endotel, fibroblas, namun tidak ada pada permukaan sel darah merah. CD46 menyediakan perlindungan jaringan dari tindakan pelengkap.
• CD61 adalah antigen platelet. Hal ini diungkapkan pada platelet darah perifer dan sumsum tulang merah, serta pada megakaryocytes dan megacaryoblasts. Definisinya digunakan sebagai penanda leukemia megakaryoblastik akut. Ekspresi antigen tidak ada atau ditekan pada pasien dengan trombastenia Glanzmann.
• CD95, yang juga disebut Fas atau APO-1, adalah glikoprotein transmembran, anggota keluarga reseptor faktor nekrosis tumor. Hal ini dinyatakan dalam jumlah yang signifikan pada limfosit T perifer (CD4 + dan CD8 +) dan, pada tingkat yang lebih rendah, pada limfosit B dan sel NK. Antigen ini juga diekspresikan pada granulosit, monosit, sel jaringan dan sel neoplastik. Pengikatan CD95 ke ligan Fas (CD95L) menginduksi apoptosis di sel.
• CD95L, atau Fas ligand, protein membran yang termasuk dalam famili reseptor faktor nekrosis tumor. Antigen ini diekspresikan oleh limfosit T sitotoksik, sel NK dan sangat sering oleh sel tumor; inducer utama apoptosis dalam sel.
• HLA-DR adalah determinan monomorfik molekul kelas II dari kompleks histokompatibilitas manusia utama (HLA). Penanda tersebut diekspresikan pada sel Langerhans, sel dendritik organ limfoid, jenis makrofag tertentu, limfosit B, sel T yang diaktifkan dan sel epitel timus. Tes untuk penanda ini digunakan untuk mengukur limfosit T-teraktivasi dengan fenotipe CD3 + HLA-DR +.

Dengan menggunakan berbagai pilihan antibodi monoklonal terhadap spidol, adalah mungkin untuk membuat potret fenotipik sel yang khas dari bentuk leukemia tertentu.

Selain penggunaan immunophenotyping untuk diagnosis dan diagnosis banding hemoblastosis, sangat penting untuk menggunakannya dalam pengobatan untuk menilai keadaan remisi dan populasi residu sel leukemia. Mengetahui "potret" fenotipik sel blast pada saat diagnosis, spidol ini berhasil mendeteksi sel kloning leukemia selama periode remisi, dan seiring bertambahnya jumlah mereka, diperkirakan perkembangan kambuh jauh sebelum munculnya tanda klinis dan morfologisnya (1-4 bulan).

[1], [2], [3], [4],