Penanda imunohistokimia dalam diagnosis lesi prakanker pada mukosa mulut dan batas merah bibir

Diagnosis tepat waktu dan efektif terhadap lesi neoplastik pada mukosa mulut (OM) dan batas merah bibir (VBL) masih menjadi masalah serius dalam onkostomatologi. Karsinoma sel skuamosa rongga mulut menempati urutan keenam di dunia dalam hal frekuensi di antara tumor ganas di semua lokasi. Di Federasi Rusia, insiden neoplasma ganas rongga mulut adalah 2-4% dari total jumlah tumor ganas pada manusia.

Dalam beberapa tahun terakhir, terjadi perubahan signifikan dalam struktur penyakit mukosa mulut, khususnya peningkatan proporsi penyakit prakanker. Dalam hal ini, deteksi tanda-tanda keganasan non-invasif yang efektif tetap menjadi tugas mendesak dalam kedokteran gigi.

Meskipun visualisasi klinis perubahan prediktif pada mukosa mulut dan CCG yang berhubungan dengan lokalisasi eksternal tampak sederhana, definisi bentuk nosologis prakanker, yang hanya berdasarkan kesan pemeriksaan dan palpasi, sering kali menyebabkan kesalahan diagnostik, karena tingkat keratinisasi atau ulserasi yang bervariasi pada elemen penanda lesi membuatnya sulit dibedakan. Diagnosis dini keganasan sangat sulit, karena tanda klinisnya muncul sedikit lebih lambat daripada transformasi ganas yang sebenarnya.

Dengan demikian, penelitian VP Kharchenko dkk. menunjukkan bahwa lebih dari 2/3 pasien memiliki stadium III-IV penyakit tersebut pada saat mereka mencari perhatian medis dan didiagnosis. Salah satu alasan keterlambatan pengobatan adalah gambaran klinis yang "kabur" pada stadium awal penyakit. Selain itu, kebutuhan akan kerja organisasi dan metodologi serta peningkatan tingkat pengetahuan dokter gigi tentang manifestasi klinis awal penyakit prakanker pada mukosa mulut telah terbukti. Pengujian menunjukkan bahwa hanya 42,8% dokter gigi yang membedakan manifestasi awal kanker mukosa mulut, 4,2% responden dapat melakukan tindakan diagnostik primer dengan benar untuk mendeteksi kanker lokalisasi ini.

Persentase bentuk kanker mukosa mulut yang tidak dapat disembuhkan akibat kesalahan diagnostik, menurut berbagai penulis, mencapai 58,4-70%. Situasinya menjadi rumit karena masalah diagnostik klinis prakanker yang belum terselesaikan, terutama kesulitan membedakan timbulnya keganasan, serta masalah pemilihan metode pengobatan penyakit prakanker. Tidak ada indikasi absolut dan relatif untuk biopsi, terutama pada tahap pengobatan konservatif. Hingga saat ini, tidak ada satu pun contoh dalam literatur tentang kriteria diagnostik tingkat klinis yang dapat dirujuk oleh dokter gigi saat memilih metode pengobatan yang memadai untuk penyakit prakanker tertentu.

Sebagian besar penulis melihat penyelesaian kesulitan diagnostik dalam metode diagnostik tambahan (pemeriksaan sitologi, cheilostomatoscopy, biomicroscopy, optical coherence tomography). Akan tetapi, metode-metode ini cukup subjektif, karena hanya menggambarkan perubahan kualitatif pada jaringan yang terkena. Salah satu metode untuk penilaian kuantitatif perubahan morfologi adalah penentuan penanda imunohistokimia.

Pengenalan metode morfologi modern untuk verifikasi tumor ke dalam praktik sehari-hari telah meningkatkan kualitas diagnostik dan pengobatan neoplasma ganas secara signifikan. Kemampuan metodologis onkologi molekuler modern telah berkembang; saat ini, dengan menggunakan penelitian imunohistokimia, dimungkinkan untuk menetapkan tidak hanya diagnosis histologis tumor, tetapi juga untuk memberikan karakteristik morfofungsionalnya dalam hal agresivitas dan prognosis dalam kaitannya dengan lesi prakanker dan penyakit onkologis yang telah berkembang.

Menurut konsep modern, transformasi sel ganas didasarkan pada aktivasi onkogen seluler tunggal atau ganda atau gen penekan. Hal ini diamati pada 30% kanker manusia dan dalam banyak kasus dapat dideteksi secara imunohistokimia. Onkogen ras p21, HER2/neu, bcl-2 dan gen penekan p53 dan Rb telah dipelajari dalam berbagai tumor. Beberapa onkogen yang tercantum (dan gen penekan) merupakan fitur prognostik dan prediktif yang independen.

Epitel mukosa mulut merupakan lokus praedifeksi pembentukan tumor kanker. Faktor eksternal (nodus oklusi traumatik, tepi restorasi yang tajam, struktur ortopedi yang tidak stabil, kebersihan mulut individu yang tidak rasional, lesi periodontal yang merusak akibat inflamasi) bersama dengan faktor genetik (keturunan) dapat berperan dalam terjadinya kanker lokalisasi ini. Kerusakan pada mekanisme kontrol hiperplasia epitel dan proses metaplasia sel skuamosa dapat berperan dalam perkembangan kanker sel skuamosa pada mukosa mulut.

Ciri morfologi epitel mukosa mulut dalam proses keganasan dikaitkan dengan perubahan pada set penanda diferensiasi (terutama fenotip sitokeratin lapisan epitel), ekspresi CEA, serta penanda proliferasi Ki - 67.

P53 adalah gen penekan tumor yang produk proteinnya merupakan faktor transkripsi nuklir dengan banyak fungsi, termasuk menghalangi perjalanan sel melalui siklus sel dan menginduksi apoptosis. Protein p53 diekspresikan dalam semua sel tubuh. Jika tidak ada kerusakan pada aparatus genetik, protein p53 tidak aktif, dan ketika kerusakan DNA terjadi, protein tersebut diaktifkan. Aktivasi terdiri dari perolehan kemampuan untuk mengikat DNA dan mengaktifkan transkripsi gen yang mengandung urutan nukleotida di wilayah pengatur, yang disebut sebagai elemen respons p53. Mutasi p53, yang terjadi pada sel sekitar 50% tumor kanker, menyebabkan sintesis protein dengan hilangnya fungsinya, tetapi memiliki stabilitas tinggi dan terakumulasi dalam nukleus, yang diekspresikan secara imunohistokimia dalam pewarnaan nuklir yang berbeda.

Tipe "liar" dari gen penekan tumor wt-53 dan protein p53 yang dikodenya memainkan peran utama dalam perkembangan apoptosis. Ketika DNA rusak, gen wt53 dan protein yang sesuai diekspresikan. Yang terakhir menghalangi siklus sel dalam fase G1-S dan dengan demikian menghambat replikasi lebih lanjut dari DNA yang rusak, yang disintesis dalam fase S, dan menciptakan kondisi untuk pembuangan lokasi yang rusak dan perbaikan bagiannya yang berubah. Jika perbaikan terjadi, sel terus membelah dan menghasilkan sel-sel yang sehat. Namun, jika perbaikan tidak terjadi, mekanisme lain diaktifkan yang memastikan penghancuran sel tersebut dengan DNA yang rusak (mutagenik), yaitu program genetik kematian sel, apoptosis, berkembang.
Penelitian terkini menunjukkan bahwa status p53 mungkin merupakan faktor penentu sensitivitas tumor terhadap terapi kemoterapi dan radiasi. Asumsi ini didukung oleh banyak penelitian yang menunjukkan bahwa p53 yang bermutasi merupakan faktor dalam prognosis yang buruk dan ketidakefektifan terapi adjuvan untuk berbagai neoplasma mukosa mulut.

Penanda proliferasi juga memiliki nilai diagnostik yang sangat informatif dalam memprediksi perjalanan tumor ganas. Aktivitas proliferatif merupakan faktor utama baik dalam mekanisme transformasi sel ganas maupun dalam perilaku biologis tumor yang telah muncul. Penanda aktivitas proliferatif yang menjanjikan adalah antigen Ki-67, yang diekspresikan dalam hampir semua fase siklus sel dan, karenanya, mencerminkan ukuran kumpulan proliferatif. Gen yang mengkode Ki-67 terletak pada lengan panjang kromosom 10. Ki-67 adalah protein pengatur. Kemunculannya bertepatan dengan masuknya sel ke dalam mitosis, yang memungkinkannya digunakan sebagai penanda proliferasi universal dalam menilai pertumbuhan tumor ganas.

Sejumlah penelitian telah dilakukan untuk menguji nilai diagnostik penanda imunohistokimia dalam memprediksi perjalanan lesi prakanker pada mukosa mulut dan vermilion border. Murti PR dkk. mempelajari ekspresi p53 pada liken planus pada mukosa mulut. Penentuan imunohistokimia ekspresi p53 gagal mengungkap status ganas prakanker pada mukosa mulut. Penulis menyarankan bahwa puncak hiperekspresi p53 mendekati waktu transformasi prakanker menjadi kanker dan tidak dapat digunakan sebagai penanda awal untuk memprediksi keganasan prakanker pada mukosa mulut. Peneliti lain telah menemukan bahwa gen TP53 manusia mengkodekan sedikitnya 9 isoform yang berbeda. Anggota lain dari famili p53, p63, mencakup 6 isoform yang berbeda dan memainkan peran kunci dalam perkembangan mukosa mulut, kelenjar ludah, gigi, dan kulit. Telah disarankan bahwa p63 dikaitkan dengan perkembangan karsinoma sel skuamosa pada kepala dan leher. Namun, perubahan signifikan secara statistik dalam ekspresi isoform p53 dan p63 baru pada prakanker mukosa mulut dibandingkan dengan jaringan yang tidak berubah tidak terdeteksi. Studi De Sousa FA mengonfirmasi signifikansi prognostik penanda p53 dalam menentukan potensi transformasi ganas prakanker mukosa mulut. Pada saat yang sama, beberapa penulis percaya bahwa p53 tidak dapat digunakan sebagai satu-satunya penanda untuk memprediksi perkembangan kanker.

Yang tidak kalah menjanjikan dalam hal prognosis adalah deteksi imunohistokimia podoplanin dalam sampel jaringan yang diteliti - mukoprotein membran integral yang diekspresikan oleh endotelium kapiler limfatik yang tidak berubah maupun yang mengalami perubahan inflamasi dan neoplastik. Para peneliti mengidentifikasi hubungan yang signifikan secara statistik antara ekspresi podoplanin dan ABCG2 (protein pengikat ATP, subkelompok G2) dengan risiko transformasi ganas liken planus (risikonya secara signifikan lebih tinggi dengan ko-ekspresi podoplanin dan ABCG2 daripada tanpa ko-ekspresi podoplanin dan ABCG2) dan menyimpulkan bahwa podoplanin dan ABCG2 dapat digunakan sebagai biomarker untuk menilai risiko transformasi ganas pada lesi prakanker mukosa mulut.

Studi oleh ilmuwan asing telah mengonfirmasi signifikansi diagnostik ekspresi Fas/FasL sebagai biomarker untuk perkembangan kanker mukosa mulut. Fas adalah glikoprotein transmembran tipe I (sinonim APO-I, CD95) dan menginduksi apoptosis dalam sel setelah berinteraksi dengan ligan Fas (FasL) atau antibodi monoklonal agonis terhadap Fas.

Pada saat yang sama, diketahui bahwa Fas diekspresikan di hampir semua jenis jaringan. Peningkatan ekspresi Fas diamati di ginjal, hati, jantung, dan timus. Selain itu, reseptor ini diekspresikan pada banyak tumor, serta sel yang terinfeksi virus. Alasan resistensi berbagai jenis sel terhadap apoptosis yang bergantung pada Fas mungkin adalah peningkatan produksi Fas yang larut oleh sel-sel ini. Fas yang larut merupakan produk penyambungan alternatif dan mampu menghambat apoptosis yang diinduksi oleh antibodi monoklonal agonis terhadap Fas atau FasL.

Dengan demikian, interpretasi ambigu dari hasil penelitian yang dilakukan oleh berbagai penulis memungkinkan kita untuk menyimpulkan bahwa pada tahap pengembangan onkologi molekuler saat ini, penggunaan penanda imunohistokimia menjanjikan dalam kombinasi dengan metode diagnosis dan prognosis lain dari perjalanan lesi prakanker pada mukosa mulut.

Masalah pemeringkatan penanda imunohistokimia berdasarkan signifikansi diagnostik sangat relevan. Kami percaya bahwa dalam urutan signifikansi menurun, penanda tersebut dapat disusun dalam urutan berikut:

1. Penanda imunohistokimia dengan signifikansi diagnostik tinggi: podoplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Penanda imunohistokimia dengan signifikansi diagnostik sedang: Bax, MMP-9;
3. Penanda imunohistokimia yang menjanjikan, yang signifikansi diagnostiknya memerlukan studi lebih lanjut: MMP-2, MT1-MMP, Fas/FasL;
4. Penanda imunohistokimia yang signifikansi diagnostiknya untuk memprediksi perjalanan penyakit prakanker belum terbukti: p53, p63.

Berdasarkan analisis data kepustakaan yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa penentuan penanda imunohistokimia tidak dapat dianggap sebagai satu-satunya metode untuk memprediksi perjalanan penyakit prakanker mukosa mulut dan mengidentifikasi derajat risiko transformasi ganas, akan tetapi, meskipun demikian, metode ini mempunyai nilai diagnostik yang tinggi apabila dikombinasikan dengan metode lain untuk memprediksi perjalanan penyakit prakanker.

Peneliti senior Kuznetsova Roza Gilevna. Penanda imunohistokimia dalam diagnostik lesi prakanker pada mukosa mulut dan batas merah bibir // Practical Medicine. 8 (64) Desember 2012 / Volume 1

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]