Tes urea: persiapan, hasil, positif, negatif

Sejak identifikasi terkait dengan gastritis kronis dan tukak lambung dan Helicobacter duodenum bakteri pylori telah mengembangkan metode diagnostik, termasuk uji urease, yang dapat mendeteksi mikroorganisme pada pasien tertentu, mengkonfirmasi keterlibatan mereka dalam pengembangan penyakit gastrointestinal dan meresepkan pengobatan yang efektif.

Enzim urease sebagai biomarker infeksi Helicobacter pylori

Bakteri H. Pylori terlindungi dari lingkungan asam di lumen perut dengan dua cara. Pertama, merusak mukosa dengan flagela, mikroorganisme sampai ke lapisan bawahnya, turun ke sel epitel, di mana pH lebih tinggi (yaitu keasamannya lebih rendah). Kedua, bakteri menetralkan asam, mensintesis dalam jumlah besar, metanoenzim urease molekul tinggi aktif katalitik atau urea amidohydrolase.

Penggunaan urease dalam diagnosis  Helicobacter  dimungkinkan karena tidak hanya aktivitas sitoplasma enzim ini, tetapi juga interaksi eksternal dengan sel inang.

Di bawah pengaruh urease, urea urea terurai menjadi hidrogen nitrida (amonia) dan karbon dioksida (karbon dioksida). Mereka bereaksi dengan asam hidroklorik dari jus lambung dan menyediakan sekitar H. Pylori zona dengan keasaman netral, dan juga mendukung metabolisme sel bakteri.

Itulah sebabnya urease adalah kolonisasi penting dari H. Pylori dari mukosa lambung manusia, dan mengidentifikasi aktivitas ureoliticheskoy dianggap sebagai biomarker dari virulensi dari bakteri yang Pencernaan - menghabiskan uji urease - digunakan untuk diagnosis infeksi H. Pylori serta untuk memantau hasil penghancuran obat-induced (pemberantasan) bakteri.

Diagnosis H. Pylori mencakup tes invasif dan non-invasif - tergantung pada apakah pemeriksaan endoskopik pada lambung (fibrogastroduodenoscopy) diperlukan atau tidak. Uji invasif adalah tes urease yang cepat atau tes ekspres untuk urease (uji RUT), yang memerlukan contoh jaringan (biopsi). 13C urease respiratory test (13C-UBT) - yang paling umum di antara tes non-invasif.

Perlu dicatat bahwa diagnosis H. Pylori non-invasif dapat dilakukan dengan menggunakan tes darah untuk antibodi (spesifisitas pada 75%, sensitivitas - 84%), analisis urin ELISA (dengan sensitivitas spesifisitas 96% dan 79%), coprogram untuk bakteri antigen. Informasi lebih lanjut -  Helicobacter pylori infection: antibodi terhadap Helicobacter pylori dalam darah

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Indikasi untuk prosedur ini uji urease

Dengan sendirinya kolonisasi mukosa perut H. Pylori bukanlah penyakit, ini adalah faktor peningkatan beban bakteri pada tubuh, yang dalam kondisi tertentu dapat memberi dorongan pada perkembangan sejumlah patologi gastrointestinal lambung dan atas.

Indikasi untuk diagnosis infeksi H. Pylori, khususnya, tes urease, yang berhubungan dengan gastritis dengan keasaman tinggi, dan gastritis antral atrofi, duodenitis, ulkus lambung dan ulkus duodenum, lambung MALT-limfoma. Setelah reseksi endoskopik terhadap kanker lambung dini, pemeriksaan histologis dapat dilakukan bersamaan dengan tes urease yang cepat, sebuah PHD dengan tes urease.

Pencernaan dapat menunjuk uji urease dengan keluhan pasien untuk perasaan berat dan ketidaknyamanan di daerah epigastrium, sering mulas setelah makan, bersendawa asam atau busuk di kepahitan di mulut, mual, gangguan pencernaan, sakit atau kram nyeri di perut.

[8], [9]

Persiapan

Persiapan untuk tes pernafasan 13C urease adalah bahwa pasien harus berhenti: minum antibiotik 4 minggu sebelum pengujian, dan NSAID, persiapan kelompok inhibitor pompa proton (mengurangi keasaman lambung) dan antasida atau adsorben yang digunakan untuk mulas - setidaknya dua minggu. Penerimaan obat apapun harus dihentikan dalam lima sampai enam hari, dan penggunaan minuman dan rokok yang mengandung alkohol - tiga hari sebelum tes.

Selain itu, sekitar seminggu sebelum pengujian, dianjurkan untuk tidak mengkonsumsi kacang polong, karena kacang-kacangan, kacang polong, kacang polong, kedelai dan kacang-kacangan memiliki urease (yang melindungi tanaman dari penyakit dan hama).

Di malam menjelang malam ujian, makan malam makan malam terlambat dikontraindikasikan; pada hari pengujian Anda perlu melakukan kebersihan mulut yang biasa, dan selama satu setengah jam sebelum analisis tidak boleh minum apapun atau gunakan kacang hijau.

[10], [11], [12], [13], [14]

Teknik uji urease

Teknik:

• Pertama ambil sampel pernapasan dasar - dihembuskan ke wadah plastik lembut (dan ditutup rapat);
• diambil secara internal dengan cairan dengan penambahan 13C-urea;
• Setelah 25-30 menit sampel kedua udara yang dihembuskan diambil - ke wadah lain.

Sampel yang diperoleh dianalisis pada spektrometer massa dengan pemisahan isotop pada sampel kedua dan penentuan konsentrasinya. Perbedaan antara nilai kedua dan sampel pertama dinyatakan sebagai delta (δ) dibandingkan dengan baseline. Nilai normal, yaitu nilai negatif atom 13C berlabel pada pasien yang tidak terinfeksi, bervariasi antara 0,15 dan 0,46%, dan nilai positif dengan adanya infeksi adalah 1,2-9,5% dengan tingkat hidrolisis urea lebih dari 12-14 μg / menit.

Dan jika lebih sederhana: deteksi karbon dioksida yang diberi label dengan 13 isotop di udara yang dihembuskan menunjukkan bahwa urea telah mengalami hidrolisis dengan enzim urease H. Pylori, yang, pada kenyataannya, menegaskan fakta kehadirannya di perut.

Uji pernafasan untuk H. Pylori

Tes 13C-UBT atau 13C urease untuk Helicobacter pylori adalah salah satu metode non-invasif yang paling penting untuk mendeteksi infeksi ini: pada sensitivitas 100% dan spesifisitas 98%, risiko hasil positif palsu dan false negatif dibandingkan dengan histologi dan tes darah untuk antibodi lebih rendah 2 , 3%.

Analisis ini didasarkan pada hidrolisis urea urea urease H. Pylori yang diberikan secara oral, diberi label dengan atom (isotop non-radioaktif stabil) dari karbon 13C (50-75 mg 13C-urea, diencerkan dengan 100 ml cairan).

Urea, diberi label dengan indikator isotop, mengalami hidrolisis di perut, melepaskan amonia dan mengandung atom karbon dioksida berlabel, yang berdifusi ke dalam darah dan dilepaskan dari paru-paru saat bernafas. Karbon dioksida berlabel memperbaiki peralatan untuk analisis - spektrometer massa, yang aksinya didasarkan pada spektroskopi isotopelektif non-dispersif, atau penganalisis spektroskopi inframerah.

Uji urease yang cepat

Uji urease cepat (Rapid Urease Test atau RUT) dilakukan selama pemeriksaan endoskopik perut dan duodenum - menggunakan endofibroskop modern - dan pengambilan sampel biopsi secara simultan. Biomaterial harus diambil dari bagian antral perut. Jadi fibroadastroduodenoscopy atau FGD dengan tes urease adalah metode diagnostik invasif.

Biopsi yang dihasilkan benar-benar direndam dalam media standar jadi yang mengandung gel agar, urea, indikator asam basa phenolsulfophthalein dan bakteriostatik (ditambahkan untuk mencegah pertumbuhan mikroorganisme polutan dan hasil positif palsu).

Jika bakteri H. Pylori ada dalam sampel jaringan lambung, urease yang dihasilkan oleh mereka akan menghidrolisis urea dan menaikkan pH, yang jelas terlihat dengan mengubah warna kuning indikator menjadi oranye (pada pH 6,8) dan ungu (pada pH> 8) 75% dari tes positif. Berubah warna dalam 120-180 menit, dan semakin cepat indikator berubah warna, semakin banyak bakteri yang ada. Tapi tes yang tampil negatif, tahan selama 24 jam.

Tes urease cepat positif, ada apa? Sebuah tes RUT positif - kemerahan indikator - menunjukkan bahwa setidaknya ada 105 bakteri H. Pylori dalam spesimen biopsi yang ditempatkan pada media agar, walaupun biasanya konsentrasinya lebih tinggi.

Sensitivitas berbagai modifikasi tes bervariasi pada kisaran 90-98%, dan spesifisitasnya adalah 97-99%.

Seperti yang dilaporkan oleh gastroenterologists, jika pasien memiliki tes urease yang positif secara tajam (tiga persilangan dimasukkan ke dalam kesimpulan), ini berarti: pH> 8, dan indikator telah berubah warna dalam waktu kurang dari 60 menit dari saat perendaman biopsi, yang mengindikasikan sejumlah besar H.pylori dan ekspresi urease tingkat tinggi. Perkiraan jumlah bakteri dapat dihitung dengan pemeriksaan histologis spesimen biopsi di bawah mikroskop, dan jika situs pencitraan melebihi 40-50, tingkat infeksi dianggap tinggi.

Uji pernafasan 13C urease jarang memberikan hasil positif palsu, dan pada pasien dengan dugaan tukak lambung atau ulkus duodenum, satu tes positif dianggap sebagai konfirmasi diagnosis, sedangkan hasil negatif harus dikonfirmasi dengan hasil EGF dengan tes urease.