Mikroskop intravital confokal kornea

Mikroskopi cekungan kornea adalah salah satu metode penyelidikan modern; memungkinkan untuk melakukan pemantauan intravital kornea dengan visualisasi jaringan pada tingkat seluler dan mikrostruktur.

Metode ini, karena desain asli mikroskop dan resolusi tinggi, memungkinkan untuk memvisualisasikan jaringan kornea yang hidup, untuk mengukur ketebalan masing-masing lapisannya, dan untuk menilai tingkat gangguan morfologi.

Tujuan mikroskop confocal kornea

Ciri perubahan morfologis pada kornea, timbul dari berbagai penyakit inflamasi dan distrofi, serta dari intervensi bedah dan efek CR.

Data morfologi diperlukan untuk menilai tingkat keparahan proses patologis, efektivitas pengobatan dan menentukan taktik manajemen pasien.

Indikasi untuk prosedur ini

• Penyakit inflamasi kornea ( keratitis ).
• Penyakit dystrophic pada kornea ( keratoconus, distrofi Fuchs, dll.).
• Sindrom "mata kering".
• Kondisi setelah intervensi bedah pada kornea (melalui transplantasi kornea, operasi keratorefractive).
• Kondisi yang berhubungan dengan pemakaian lensa kontak.

[1], [2], [3], [4]

Persiapan

Penelitian ini dimungkinkan tanpa menggunakan anestesi. Setetes cairan perendaman ditempatkan pada lensa lensa mikroskop confocal. Ini menghilangkan kontak langsung lensa dengan kornea dan meminimalkan risiko kerusakan epitel.

[5], [6], [7], [8], [9],

Teknik mikroskop confocal kornea

Penelitian dilakukan pada confocal mikroskop ConfoScan 4 (Nider) dengan peningkatan 500 kali. Perangkat ini memungkinkan Anda untuk memeriksa kornea di atas seluruh ketebalannya.

Ukuran zona yang diteliti adalah 440 × 330 μm, ketebalan lapisan pemindai adalah 5 μm. Lensa dengan setetes gel dibawa ke kornea untuk disentuh dan disetel sehingga ketebalan lapisan cairan perendaman 2 mm. Perancangan perangkat memungkinkan Anda memeriksa kornea di zona tengah dan daerah paracentralnya.

Kontraindikasi terhadap prosedur

Kontraindikasi relatif ditandai iritasi mata terhadap latar belakang proses inflamasi akut.

[10], [11]

Kinerja normal

Gambaran morfologis normal kornea

Epitel anterior terdiri dari 5-6 lapisan sel. Ketebalan rata-rata seluruh epitel kira-kira 50 μm. Menurut struktur morfologi, lapisan berikut dibedakan (dari dalam ke luar): basal, subulate dan dangkal.

• Lapisan paling dalam (basal) diwakili oleh sel silinder kecil padat tanpa nukleus yang terlihat. Batas sel basal jelas, terang.
• Lapisan tengah terdiri dari 2-3 lapisan sel berbentuk tulang belakang (bersayap) dengan invaginasi mendalam, di mana perkembangan sel tetangga dibangun. Secara mikroskopis, batas sel cukup terbedakan, dan nukleus tidak dapat didefinisikan atau tidak jelas.
• Lapisan permukaan epitel diwakili oleh satu atau dua lapisan sel poligonal dengan batas yang jelas dan kerapatan homogen. Inti biasanya lebih terang dari sitoplasma, di mana seseorang juga bisa membedakan cincin gelap dekat nukleus.

Di antara sel-sel lapisan permukaan membedakan antara gelap dan terang. Peningkatan reflektivitas sel epitel menunjukkan penurunan tingkat metabolisme di dalamnya dan awal deskuamasi mereka.

Membran Bowman adalah struktur transparan yang tidak memantulkan cahaya, jadi tidak mungkin untuk memvisualisasikannya saat mikroskop confocal dilakukan.

Plasenta saraf subbasum terletak di bawah membran Bowman. Biasanya, serabut saraf terlihat seperti strip terang yang berjalan sejajar dengan latar belakang gelap, saling bersentuhan. Reflektifitas (reflektifitas) bisa merata dalam panjang serat.

Stroma kornea menempati 80 sampai 90% ketebalan kornea dan terdiri dari komponen seluler dan ekstraselular. Elemen seluler dasar stroma adalah keratosit; merupakan sekitar 5% dari volume.

Pola mikroskopis khas stroma mencakup beberapa badan berbentuk oval tidak beraturan yang terang (inti keratosit) yang terletak pada ketebalan matriks abu-abu gelap atau hitam transparan. Biasanya, visualisasi struktur ekstraselular tidak mungkin dilakukan karena transparansi mereka. Stroma dapat dibagi secara kondisional menjadi sublayer: anterior (terletak tepat di bawah membran Bowman dan merupakan 10% ketebalan stroma), anterior, tengah dan posterior.

Kepadatan rata-rata keratosit lebih tinggi pada stroma anterior, secara bertahap jumlahnya menurun ke lapisan posterior. Kepadatan sel stroma anterior hampir dua kali lipat dari sel stroma posterior (jika kepadatan sel stroma anterior diambil 100%, maka kerapatan sel stroma posterior sekitar 53,7%). Pada stroma anterior, inti keratosit memiliki bentuk berbentuk kacang bulat, dan di bagian posterior oval dan lebih memanjang.

Inti keratosit bisa berbeda dalam kecerahan. Kemampuan berbeda untuk memantulkan cahaya tergantung pada keadaan metaboliknya. Sel yang lebih terang dianggap sebagai keratosit yang diaktifkan ("sel stres"), yang aktivitasnya ditujukan untuk mempertahankan homeostasis kornea internal. Dalam norma dan bidang pandang, ada satu sel teraktivasi.

Serabut saraf di stroma anterior kornea divisualisasikan sebagai pita homogen yang terang, sering membentuk bifurkasi.

Membran descemet biasanya transparan dan tidak divisualisasikan dengan mikroskop confocal.

Epitel posterior adalah monolayer sel datar heksagonal atau poligonal dengan permukaan cahaya seragam dengan latar belakang batas interselular gelap yang berbeda.

Perangkat ini menyediakan kemungkinan perhitungan otomatis atau manual kepadatan sel, daerah mereka dan koefisien variabilitasnya.

Perubahan patologis pada struktur kornea

Keratoconus ditandai oleh perubahan signifikan pada epitel anterior dan stroma kornea.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20]