Protein Bence-Jones

Urine orang sehat tidak mengandung protein Bence-Jones, yang diwakili oleh rantai ringan imunoglobulin yang terdeteksi sebagai hasil pembentukan proses tumor ganas.

Uji laboratorium untuk mengetahui keberadaan protein berat molekul rendah tertentu diperlukan untuk mendiagnosis sejumlah kondisi patologis (paling sering masalah pada sistem imun β), serta untuk menentukan efektivitas terapi yang digunakan.

Protein Bence-Jones diproduksi secara berlebihan oleh sel plasma, bergerak bersama aliran darah, dan dikeluarkan melalui urin. Sifat terakhir dari badan protein inilah yang memungkinkan seseorang untuk mencurigai penyakit berikut saat memeriksa urin:

• mieloma;
• osteosarkoma;
• plasmasitoma;
• leukemia limfositik kronis;
• limfogranulomatosis;
• amiloidosis primer;
• makroglobulinemia;
• gammopati monoklonal idiopatik.

Hubungan antara pelepasan protein spesifik dan disfungsi ginjal berikutnya yang disebabkan oleh efek toksik badan protein pada struktur epitel tubulus ginjal, yang pada gilirannya menyebabkan fenomena distrofi, sindrom Fanconi, dan amiloidosis ginjal, telah dikonfirmasi secara klinis.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Protein Bence Jones dalam urin

Adanya protein dalam urin disebut proteinuria. Proteinuria prerenal dipahami sebagai adanya sejumlah besar protein molekul rendah dalam urin. Dalam kasus ini, tidak ada kerusakan pada filter dan tubulus ginjal, dan fungsi ginjal yang normal tidak mampu memastikan penyerapan kembali badan protein. Proteinuria ekstrarenal (palsu), yaitu terjadi tanpa gangguan fungsi ginjal, menunjukkan adanya proses infeksi atau ganas dalam tubuh. Proteinuria diamati pada 60-90% kasus pasien dengan mieloma. Sekitar 20% dari kondisi patologis adalah mieloma Bence-Jones.

Protein Bence-Jones dalam urin dibedakan karena adanya pergeseran humoral dalam sistem imun β. Munculnya badan protein dikaitkan dengan patologi mieloma, hemoblastosis paraproteinemik, endoteliosis, makroglobulinemia Waldenstrom, leukemia limfatik, osteosarkoma. Deteksi protein Bence-Jones dalam urin merupakan langkah diagnostik dan prognostik yang penting. Karena berat molekulnya yang rendah, protein Bence-Jones diekskresikan dalam urin, merusak epitel tubulus ginjal, yang penuh dengan perkembangan gagal ginjal, yang dapat menyebabkan kematian. Klasifikasi protein yang tepat waktu menurut jenisnya juga penting: protein λ memiliki efek nefrotoksik yang lebih besar daripada κ.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Uji Protein Bence Jones

Adanya protein selain serum dalam urin mengindikasikan leukemia limfatik, osteosarkoma, atau mieloma (proses tumor sumsum tulang). Protein Bence-Jones, ketika filtrat urin dipanaskan hingga 45-60º C, mengendap sebagai endapan keruh yang mengendap di dinding tabung reaksi. Peningkatan suhu lebih lanjut hingga mencapai titik didih melarutkan kekeruhan yang terpisah.

Uji kuantitatif untuk protein Bence Jones dilakukan sebagai berikut:

• menggunakan sebagian air dan sebagian asam nitrat sebagai reagen;
• menempatkan asam nitrat (0,5-1 ml) dalam tabung reaksi dengan pelapisan tingkat yang sama dari urin yang diuji;
• evaluasi hasil setelah 2 menit (munculnya cincin tipis pada batas media cair menunjukkan adanya badan protein 0,033%).

Pengamatan cincin seperti benang memerlukan pengenceran urin dengan air dalam rasio 1:1, munculnya cincin tebal menunjukkan perlunya mencampur sebagian urin dengan tiga bagian air, dan dalam kasus cincin padat, sebagian urin diencerkan dengan tujuh bagian air. Selain itu, pengenceran berlanjut hingga endapan karakteristik muncul pada menit ke-2 hingga ke-3 pengujian.

Jumlah protein yang terkandung dihitung dengan mengalikan 0,033% dengan nilai pengenceran. Misalnya, urin diencerkan 10 kali, cincin badan protein muncul pada akhir menit ke-3 penelitian, maka persentase masuknya protein dihitung sebagai berikut: 0,033x10 = 0,33.

Jika tidak ada sedimen, tingkat kekeruhan dinilai - jejak kekeruhan yang nyata, lemah atau hampir tidak dapat dibedakan.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Sekresi protein Bence Jones

Tergantung pada jenis imunoglobulin yang disekresikan, ada perbedaan antara:

• patologi rantai ringan (sekresi protein Bence Jones);
• glomerulopati (sekresi imunoglobulin lainnya).

Berbagai kombinasi kerusakan ginjal juga mungkin terjadi. Seperti yang ditunjukkan oleh praktik, nefropati merupakan konsekuensi dari patologi limfoproliferatif (multiple myeloma, leukemia limfositik kronis, penyakit Waldenstrom, dll.).

Ketika dilepaskan ke dalam aliran darah, seperti semua protein dengan berat molekul hingga 40 kDa, rantai ringan melewati filter ginjal, kemudian dipecah menjadi oligopeptida dan asam amino melalui lisosom. Rantai ringan yang berlebih memicu disfungsi reaksi katabolisme dan kemungkinan pelepasan enzim lisosom, yang menyebabkan nekrosis jaringan tubulus. Badan protein menyebabkan ketidakmampuan untuk menyerap kembali, dan ketika rantai ringan monoklonal bergabung dengan protein Tamm-Horsfall, silinder protein terbentuk di tubulus distal.

Protein Bence Jones pada penyakit mieloma

Mieloma multipel merupakan kondisi patologis di mana tubuh memproduksi rantai imunoglobulin ringan, bukan rantai yang lengkap. Diagnosis penyakit dan pemantauan kondisi dilakukan dengan pengujian laboratorium urin, yang menunjukkan kandungan kuantitatif protein tubuh. Spesifikasi subtipe mieloma didasarkan pada analisis serum darah. Tanda-tanda klinis penyakit ini meliputi: sindrom nyeri tulang, disfungsi buang air kecil, hematoma yang tidak diketahui asalnya, retensi cairan dalam tubuh.

Protein Bence Jones pada mieloma dideteksi berdasarkan pengujian standar yang menunjukkan kandungan kuantitatif badan protein dan menilai tingkat kerusakan ginjal. Identifikasi protein dalam urin menjelaskan kerusakan epitel dengan sklerosis stroma ginjal, yang seiring waktu membentuk gagal ginjal - penyebab umum kematian akibat kerusakan mieloma (protein Bence Jones menyumbat tubulus sepenuhnya, mencegah buang air kecil).

Data statistik menunjukkan bahwa mieloma terdiferensiasi pada laki-laki di atas usia 60 tahun, dengan riwayat kecenderungan genetik, menderita obesitas dan imunosupresi, serta pernah terpapar zat beracun dan radioaktif.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Penentuan protein Bence Jones

Untuk membedakan protein tertentu, dilakukan studi laboratorium terhadap porsi rata-rata urin pagi (diperlukan volume minimal 50 ml). Keberadaan protein Bence-Jones dengan penentuan komponen kuantitatif dimungkinkan dengan metode imunofiksasi. Pemisahan protein terjadi melalui elektroforesis dengan imunofiksasi berikutnya menggunakan serum khusus. Ketika protein berikatan dengan antibodi rantai ringan dan berat imunoglobulin, kompleks imun terbentuk, yang dinilai dengan pewarnaan.

Perlu dicatat bahwa bahkan konsentrasi minimum protein terdeteksi karena reaksi presipitasi terhadap asam sulfosalisilat. Protein Bence-Jones ditentukan dengan menggabungkan urin yang disaring (4 ml) dengan buffer asetat (1 ml). Pemanasan berikutnya hingga 60º C dalam penangas air dan penahanan selama 15 menit dengan sampel positif menghasilkan endapan yang khas. Metode ini dianggap paling dapat diandalkan. Lingkungan yang terlalu asam atau basa dan kepadatan relatif urin yang rendah dapat memengaruhi hasil analisis secara negatif.

Metode penelitian yang melarutkan protein Bence-Jones dengan pemanasan hingga 100º C atau mengendap kembali setelah didinginkan tidak dapat diandalkan, karena tidak semua elemen protein memiliki karakteristik yang sesuai. Namun, penggunaan kertas indikator sama sekali tidak cocok untuk mendeteksi protein Bence-Jones.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]